液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)富硒酵母中的硒代蛋氨酸?
硒是人體必需的微量元素，存在于抗氧化酶和甲狀腺素代謝酶的活性中心，缺硒導(dǎo)致克山病，合理補(bǔ)硒可有效減少人類及動(dòng)物患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)。蛋氨酸中硫被硒取代后得到硒代蛋氨酸，是生物利用度z ui高的有機(jī)硒化物，是生物利用度zui高的有機(jī)硒化物，人體吸收后可在體內(nèi)形成硒儲(chǔ)備池。富硒酵母是被廣泛研究的食品硒補(bǔ)充劑，在培養(yǎng)基中加入無(wú)機(jī)硒，利用酵母將難吸收的無(wú)機(jī)硒源轉(zhuǎn)化為易吸收的有機(jī)硒源。Clark等的臨床研究證明將富硒酵母納入飲食中作為硒補(bǔ)充劑可減少大約50%的癌癥發(fā)病率與死亡率。作為硒代蛋氨酸的zui經(jīng)濟(jì)來(lái)源，富硒酵母中總硒的70%-76%以硒代蛋氨酸的含量對(duì)評(píng)價(jià)其質(zhì)量與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值具有重要意義。
目前，國(guó)外測(cè)定富硒酵母中硒代蛋氨酸的方法有液相色譜串聯(lián)電感耦合等離子體質(zhì)譜法，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，毛細(xì)管電泳-電化學(xué)發(fā)光法等，國(guó)內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)較少。Chassaigne等采用烯酸提取，HPLC-ICP-MS進(jìn)行富硒酵母中有機(jī)硒檢測(cè)：Pollatajko等采用水溶液超聲提取，HPLC-MS檢測(cè)富硒酵母中硒代蛋氨酸；以上方法采用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀器昂貴，使其應(yīng)用收到一定限制。Deng等采用烯酸提取，CE-ECL檢測(cè)富硒酵母中硒代蛋氨酸；單電用方法的重現(xiàn)性不高。考慮到以上那個(gè)方法的不足以及現(xiàn)實(shí)生產(chǎn)應(yīng)用中對(duì)檢測(cè)方法的要求——需兼顧準(zhǔn)確性與經(jīng)濟(jì)性，本實(shí)驗(yàn)針對(duì)富硒酵母中硒代蛋氨酸進(jìn)行分析，采用酶解法進(jìn)行樣品提取，通過(guò)對(duì)樣品的色譜分離及衍生等條件進(jìn)行研究，建立了丹磺酰氯柱前衍生液相色譜-熒光法測(cè)定富硒酵母中硒代蛋氨酸。
