高效液相色譜系統(tǒng)在日常中主要用以下這四種色譜法
高效液相色譜系統(tǒng)根據(jù)分離機(jī)制的不同,HPLC原理可分為離子交換色譜法、分子排阻色譜法、液固吸附色譜法及液液分配色譜法。
1、離子交換高效液相色譜法:
固定相是離子交換樹脂。樹脂上可電離離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進(jìn)行交換,根據(jù)各離子與離子交換基團(tuán)具有不同的電荷吸引力而分離。
2、分子排阻色譜法:
分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法,它是按照分子尺寸大小順序進(jìn)行分離的一種色譜方法。分子排阻色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料,有一定的形狀和穩(wěn)定性,利用分子篩對分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。根據(jù)所用流動(dòng)相的不同,凝膠色譜法可以分為兩類:即用水溶劑做流動(dòng)相的凝膠過濾色譜法(GFC)與用有機(jī)溶劑如THF做流動(dòng)相的凝膠滲透色譜法(GPC)。
3、液液分配色譜法:
固定相為液體,根據(jù)被分離的組分在流動(dòng)相和固定相中的溶解度不同而分離。依固定相和流動(dòng)相的極性不同可分為正相色譜法和反相色譜法。正相色譜法采用極性固定相,流動(dòng)相為相對非極性的疏水性溶劑,常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物;高效液相色譜系統(tǒng)法一般用非極性固定相,流動(dòng)相為水或緩沖溶液,適用于分離非極性和極性較弱的化合物。